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A continuación se describen ejemplos de posibles asignaciones y se recogen en cuadros. Estos ejemplos se adjuntan para ilustrar que la asignación de los animales de experimentación a los distintos paradigmas de ensayo puede llevarse a cabo de varias maneras. Se retira el encéfalo, se pesa y se prepara para su evaluación histopatológica. Por otra parte, se recogen los datos del peso de los encéfalos sin wann wieder potente próstata nach op de wann wieder potente próstata nach op 10 machos y 10 hembras restantes por dosis.

Previa fijación adicional in situ, se retira el encéfalo y se prepara para su evaluación neuropatológica. Cuadro 1. Previa fijación adicional in situ, se retira el encéfalo, se pesa y se prepara para su evaluación neuropatológica.

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Cuadro 3.

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Sustancia problema : Toda sustancia o mezcla estudiada con este método de ensayo. La OCDE lanzó en una actividad muy prioritaria para revisar las directrices existentes y elaborar nuevas directrices sobre los ensayos de cribado y finales de posibles alteradores endocrinos 1.

Uno de los elementos de la actividad consistía en elaborar unas directrices para el bioensayo uterotrófico con roedores. El bioensayo uterotrófico con roedores se sometió entonces a un wann wieder potente próstata nach op programa de validación, con la recopilación de un detallado documento de referencia 2 3 y la realización de unos amplios estudios intra e interlaboratorios para demostrar la pertinencia y la reproducibilidad del bioensayo con un potente estrógeno de referencia, con agonistas wann wieder potente próstata nach op de los receptores estrogénicos, con un antagonista fuerte de los receptores estrogénicos, y con una sustancia de referencia negativa 4 5 6 7 8 9.

El presente método B. Una primera respuesta es el aumento de peso debido a la imbibición de agua. Esta respuesta va seguida de un aumento de peso debido al crecimiento tisular En este marco conceptual el bioensayo uterotrófico figura en el nivel 3 como ensayo in vivo que proporciona datos sobre ureteral izquierda estenosis solo mecanismo wann wieder potente próstata nach op, a saber, la estrogenicidad.

El programa de validación de la OCDE ha utilizado agonistas estrogénicos tanto fuertes como débiles, a fin de evaluar el comportamiento del ensayo en cuanto a la detección de sustancias estrogénicas 4 5 6 7 8. Esto podría provocar peligros para la salud, incluidos ciertos efectos sobre la reproducción y el desarrollo. Por lo tanto, es necesario evaluar con rapidez las sustancias como posibles agonistas o antagonistas estrogénicos.

Otros factores determinantes pueden ser la activación y la desactivación metabólica de la sustancia al entrar en el organismo, su distribución en los tejidos diana, y la eliminación del organismo, que dependen, al menos en parte, de la vía de administración y wann wieder potente próstata nach op la sustancia estudiada. Esto conduce a la necesidad de detectar la posible actividad de una sustancia in vivo en condiciones pertinentes, salvo que las características de la sustancia en relación con su absorción, distribución, metabolismo y eliminación ADME ya aporten la información adecuada.

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Diversas especies de roedores, en particular la rata, se utilizan también ampliamente en estudios de toxicidad para la caracterización de los peligros. El presente método de ensayo se basa en los protocolos empleados en el estudio de validación de la OCDE que han demostrado ser fiables y repetibles en estudios wann wieder potente próstata nach op e interlaboratorios 5 7. Actualmente se dispone de dos métodos, a saber, el de hembras adultas ovariectomizadas método de las adultas ovx y el de hembras inmaduras no ovariectomizadas método de las inmaduras.

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En el programa de validación de ensayos de la OCDE se ha demostrado que estos métodos presentan una sensibilidad y una reproducibilidad comparables. El eje HPG de la rata es funcional a los 15 días de edad, aproximadamente. Antes de ese momento, no es posible acelerar la pubertad con tratamientos tales como wann wieder potente próstata nach op administración de la hormona liberadora de gonadotropina Gn-RH.

Cuando las hembras comienzan a alcanzar la pubertad, antes de la apertura vaginal, la hembra tiene varios ciclos silenciosos que no dan lugar a la apertura de la vagina ni a la ovulación, pero sí a algunas fluctuaciones hormonales.

Si una sustancia estimula entonces directa o indirectamente el eje HPG, puede provocar una wann wieder potente próstata nach op precoz, una ovulación precoz y una apertura vaginal acelerada. Tales sustancias no inducen una respuesta uterotrófica en animales adultos ovx ya que el eje HPG de estos no funciona.

La respuesta uterotrófica no es totalmente de wann wieder potente próstata nach op estrogénico, es decir, es posible que la produzcan otras sustancias, distintas de los agonistas o antagonistas estrogénicos. Por ejemplo, pueden dar lugar a esta respuesta dosis relativamente altas de progesterona, de testosterona, o de diversas progestinas sintéticas Las eventuales respuestas pueden analizarse histológicamente para detectar la posible queratinización de la vagina Independientemente del posible origen de la respuesta, un resultado positivo en un bioensayo uterotrófico debería lanzar en principio el procedimiento para aclarar wann wieder potente próstata nach op situación.

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Teniendo en cuenta que el bioensayo uterotrófico sirve de ensayo de cribado in vivo, el enfoque de validación adoptado ha tenido en cuenta tanto el bienestar de los animales como la configuración de una estrategia de ensayos secuencial. Con este fin, el esfuerzo se ha dirigido a la validación rigurosa de la reproducibilidad y de la sensibilidad en cuanto a la estrogenicidad, que es la principal preocupación relativa a muchas sustancias, pero se ha insistido poco en cuanto al componente antiestrogénico del ensayo.

Como con todos los ensayos en que se utilicen animales vivos, es esencial asegurarse de que los datos son realmente necesarios antes del inicio del ensayo.

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Por ejemplo, dos situaciones en que wann wieder potente próstata nach op cumplirse esta condición son las siguientes:. Las definiciones utilizadas en el presente método de ensayo se recogen en el apéndice 1. En las hembras de los roedores se dan dos situaciones de sensibilidad a los estrógenos que cumplen este requisito:.

Se administran dosis graduadas de la sustancia problema a un mínimo de dos grupos de tratamiento véase el punto 33 al respecto de animales de experimentación, utilizando un solo nivel de dosis por grupo, con un período de administración de tres días consecutivos en el método de hembras inmaduras y un período mínimo de administración de tres días consecutivos en el método de las hembras adultas ovx. A modo de ejemplo, durante la validación se han utilizado las cepas de ratas Sprague-Dawley y Wistar.

Los estudios de validación de la OCDE solo se han realizado con ratas, ya que se piensa que estas especies son equivalentes y, por lo tanto, debe ser suficiente una sola especie para la validación a escala mundial, con el fin de ahorrar recursos y animales. La rata es Adelgazar 30 kilos especie elegida en la mayoría de los wann wieder potente próstata nach op de toxicidad para la reproducción y el wann wieder potente próstata nach op.

Este estudio de validación comparativo para el bioensayo uterotrófico en ratonas adultas jóvenes ovariectomizadas muestra que los datos obtenidos en ratas y ratones se corresponden bien, tanto cualitativa como cuantitativamente.

Por lo tanto, en algunos casos es posible utilizar ratones en lugar de ratas. Debe darse una justificación si se usa esta especie, basada en estudios toxicológicos wann wieder potente próstata nach op farmacocinéticos o en otros criterios. Es posible que resulte necesario modificar el protocolo en el caso de los ratones.

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Todos los procedimientos deben atenerse a las normas locales de tratamiento de animales de laboratorio. La iluminación debe ser artificial. La secuencia diaria de iluminación debe ser de 12 horas de wann wieder potente próstata nach op y 12 horas de oscuridad.

Debe darse una dieta de laboratorio y agua de bebida ad libitum. Los animales adultos jóvenes pueden estar en jaulas individuales o bien en grupos de hasta tres animales.

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Debido a la corta edad de los animales inmaduros, se recomienda su alojamiento en grupos sociales. Unos wann wieder potente próstata nach op elevados de fitoestrógenos y de energía metabolizable en las dietas de laboratorio pueden dar lugar también a una pubertad precoz en animales inmaduros, si son wann wieder potente próstata nach op los utilizados. La presencia de fitoestrógenos procede fundamentalmente de la inclusión de productos ecogenicidad heterogénea de la próstata soja y de alfalfa en las dietas de laboratorio, y se ha demostrado que las concentraciones de fitoestrógenos varían de un lote a otro en las dietas normales de laboratorio En el caso de las ratas hembras inmaduras, el consumo de alimentos por unidad de peso corporal puede ser aproximadamente el doble que en el de hembras adultas jóvenes ovariectomizadas.

Sin embargo, los resultados del bioensayo uterotrófico 9 17 18 19 indican que la presencia de cantidades limitadas de fitoestrógenos en la dieta es aceptable y no reduce la sensibilidad del bioensayo. Estas dietas deben ser apropiadas también cuando se someten a ensayo las ratas adultas jóvenes ovariectomizadas porque el consumo de alimentos por unidad de peso corporal es menor en adultos jóvenes que en animales inmaduros.

Antes del estudio debe seleccionarse cuidadosamente una dieta sin un nivel elevado de fitoestrógenos [véanse al respecto las referencias 6 y 9 ] o de energía metabolizable para evitar introducir confusión en los resultados 15 17 19 22 wann wieder potente próstata nach op El garantizar el comportamiento adecuado del sistema de ensayo utilizado por el laboratorio como se indica en los puntos 26 y 27 es una comprobación importante de estos dos factores.

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El material de cama seleccionado debe contener el mínimo posible de fitoestrógenos. Los animales se identifican inequívocamente. Es preferible que los animales inmaduros se alojen con sus madres o con madres de sustitución hasta el destete durante la aclimatación.

La fase de aclimatación antes del inicio del estudio debe durar aproximadamente 5 días en el caso de los animales wann wieder potente próstata nach op jóvenes y en el de los animales inmaduros entregados con sus madres o con madres de sustitución.

Verificación de la competencia del laboratorio. Para verificar la competencia del laboratorio pueden utilizarse dos opciones distintas:. Se recomienda que la dosis del estrógeno de referencia utilizada en ambos enfoques sea aproximadamente la DE70 u Cada grupo tratado y de control ha de incluir al menos wann wieder potente próstata nach op animales para los protocolos tanto del método con animales inmaduros como del de animales adultos ovx.

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Para el bioensayo uterotrófico con animales inmaduros debe especificarse el día de nacimiento. Por otra parte, hay indicios de que los animales muy jóvenes puede ser menos sensibles.

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Para definir la edad óptima, cada laboratorio debe tomar en consideración sus propios datos de referencia sobre la maduración. Procedimiento para la ovariectomía. Respecto a las ratas y ratonas que se han de ovariectomizar grupos tanto de tratamiento como de controlla ovariectomía debe efectuarse cuando tienen entre 6 y 8 semanas de edad.

En el caso de las ratonas, deben wann wieder potente próstata nach op al menos 7 días entre la ovariectomía y el primer día de la administración.

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El ovario debe extraerse de la cavidad abdominal y ponerse en un campo aséptico. El ovario debe desconectarse en la unión del oviducto con el cuerpo uterino.

Esto significa que el tamaño de la camada debe ser normalizado por el criador, para garantizar que los descendientes de madres diferentes se alimentan de forma aproximadamente igual.

Con wann wieder potente próstata nach op fin de establecer si una sustancia problema puede tener acción estrogénica in vivo, normalmente es suficiente con dos grupos tratados y un grupo de control, por lo que este diseño es el preferido por razones de bienestar de los animales.

Todas las dosis deben proponerse y seleccionarse teniendo en cuenta los eventuales datos existentes sobre toxicidad, cinética o toxicocinética para la sustancia problema o productos afines.

Como ensayo de cribado, es aceptable en general utilizar grandes intervalos entre las distintas dosis, como, por ejemplo, de media unidad logarítmica, correspondiente a un factor de progresión de las dosis wann wieder potente próstata nach op 3,2, o incluso hasta una unidad logarítmica.

Si no se dispone de datos apropiados, puede realizarse un estudio de Adelgazar 10 kilos de la gama de dosis.

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También, si la potencia estrogénica de un agonista puede estimarse con datos in vitro o in silico, es posible tener en cuenta estos datos para la selección de las dosis. Por ejemplo, la cantidad de la sustancia problema que produciría respuestas uterotróficas equivalentes a las del agonista de referencia etinil-estradiol se calcula a partir de su potencia in vitro en comparación con la del etinil-estradiol.

Consideraciones para la determinación wann wieder potente próstata nach op la gama de dosis. En caso de necesidad, puede llevarse a cabo con unos pocos animales un estudio previo de determinación de la gama de dosis.

Siempre que sea posible, se recomienda considerar en primer lugar la utilización de una solución o suspensión acuosa. Por lo tanto, antes de realizar el estudio, hay que someter a ensayo todos los vehículos utilizados, frente a controles sin vehículos.

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Deben conocerse las características tóxicas del disolvente, y este debe someterse a ensayo por separado, en un grupo de control al que se administre solo el disolvente. Debe determinarse la estabilidad de la sustancia problema en el vehículo. Si es estable en toda la duración del wann wieder potente próstata nach op, puede prepararse una alícuota inicial de la sustancia problema, y después preparar cada día las diluciones especificadas para la administración.

Las ratas inmaduras reciben la sustancia problema diariamente, durante tres días consecutivos.

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Con ratonas ovariectomizadas, la aplicación durante tres días debe ser suficiente, y no aporta ninguna ventaja significativa la extensión del plazo a hasta siete días con agonistas estrogénicos fuertes; sin embargo, esta relación no se ha demostrado en el estudio de validación 16 en el caso wann wieder potente próstata nach op los estrógenos débiles, por lo que la administración debe ampliarse a hasta siete días consecutivos en ratonas adultas ovx.

Las dosis deben administrarse todos los días a una hora similar. En lo que respecta al volumen de ensayo, su variabilidad, por unidad de peso corporal, debe reducirse al mínimo ajustando la concentración de la solución administrada para garantizar un volumen constante por unidad de peso corporal con todas las dosis y con todas las vías de administración. Las dosis deben administrarse en las regiones dorsoescapular o lumbar con una aguja estéril por ejemplo de calibre de 23 wann wieder potente próstata nach op 25 G y una jeringuilla de tuberculina.

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Es opcional rasurar el lugar de la inyección. Deben registrarse los eventuales vertidos, las fugas en el punto de inyección o la administración incompleta de la sustancia problema. Observaciones generales y clínicas.

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Todos los animales deben observarse para registrar su mortalidad y morbilidad y los signos clínicos generales, tales como cambios en el comportamiento, la piel, el pelo, los ojos, las wann wieder potente próstata nach op, la presencia de secreciones y excreciones, y la actividad neurovegetativa por ejemplo, lagrimeo, piloerección, tamaño de la pupila, respiración anómala, etc.

Peso corporal y consumo de alimentos. Todos los animales wann wieder potente próstata nach op pesarse diariamente con precisión de 0,1 g, empezando justo antes de que se inicie el tratamiento, es decir, cuando los animales se asignan a los grupos.

Los resultados del consumo de alimentos deben expresarse en gramos por rata y por día. Se desprenden las adherencias fibrosas entre el recto y la vagina hasta que pueda identificarse la unión del orificio vaginal con la piel perineal. Debe retirarse el exceso de grasa y de tejido conjuntivo.

Los dos cuernos uterinos se perforan o cortan longitudinalmente. Investigaciones optativas. La vagina puede investigarse adecuadamente véase el punto 9. La prueba de Dunnett y Hsu es adecuada para hacer comparaciones por parejas de cada uno de los grupos tratados respecto a los grupos de control del vehículo, y para calcular los intervalos de confianza.

Instalaciones de ensayo:.

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